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甘蓝MLPK基因的克隆与序列分析
采用PCR、RT-PCR以及其他分子生物学方法,以甘蓝基因组DNA和柱头cDNA为模板对MLPK基因进行扩增克隆,首次得到长度分别为1 615 bp和1 294 bp的基因片段.序列分析表明,甘蓝MLPK与芜菁MLPK的cDNA序列相似性达98%,前者的`内含子数为4个,比后者少了3个;同时,在前者内含子中发现了不同于典型的GU-AG规则的新的序列,即第3、4个内含子5'端碱基是TA、CG,3'端碱基为CAGG、GT,推测甘蓝MLPK的mRNA具有独特的剪切机制.这为甘蓝自交不亲和分子机理研究提供了新内容.
作 者：赵永斌 朱利泉 王小佳 ZHAO Yong-Bin ZHU Li-Quan WANG Xiao-Jia 作者单位：赵永斌,ZHAO Yong-Bin(西南大学农学与生命科学学院)朱利泉,ZHU Li-Quan(西南大学农学与生命科学学院;重庆市蔬菜学重点实验室,重庆,400716)
王小佳,WANG Xiao-Jia(重庆市蔬菜学重点实验室,重庆,400716)
刊 名：作物学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA AGRONOMICA SINICA 年，卷(期)： 32(1) 分类号：Q51 关键词：自交不亲和 信号传导 MLPK基因 内含子 剪切鸡IL-12的基因克隆与序列分析
IL-12是一个70 kD的异二聚体细胞因子.由40 kD(P40)和35 kD(P35)两条多肽链组成,编码这两条链的基因位于两条不同的染色体上,各自有不同的'调节机制[1].P35、P40亚单位必须在同一细胞表达才能产生具有生物活性的异二聚体P70单体,P40单体无生物活性[2].IL-12的主要功能是在一系列病理、生理变化中促进TH1细胞增殖、分化、活化,还可以促进NK细胞增殖、分化.
作 者：董长贵 何桂梅 乔健 赵立红 董长宝 邓光存 田勇 王勋 作者单位：董长贵(中国农业大学动物医学院,北京,海淀,100094;中国科学院北京基因组研究所,北京,西城,100864)何桂梅,乔健,赵立红,邓光存,田勇,王勋(中国农业大学动物医学院,北京,海淀,100094)
董长宝(陕西省气象局,陕西,西安,710015)
刊 名：中国兽医杂志 PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)： 43(10) 分类号：Q786 关键词：玉米FAD2基因的克隆及序列分析
高等植物中的△12脂肪酸脱饱和酶是将油酸转化为亚油酸的酶.根据已发表的其他高等植物的'FAD2基因的保守序列设计同源引物,通过RT-PCR从玉米幼胚中扩增得到一个特异的cDNA基因片段.通过生物信息学分析,从玉米幼胚cDNA和基因组中均扩增得到1 164 bp FAD2基因(GenBank登陆号:DQ496227),它编码387个氨基酸,含有完整的ORF框,在ORF框内无内含子.序列联配与树状分析结果表明,FAD2推导的氨基酸序列与其他物种的△12脱饱和酶基因具有同源性.它含有3个组氨酸保守域和2段很长的疏水区,是一个跨膜4次的膜结合蛋白.半定量RT-PCR分析显示FAD2基因在玉米幼胚中表达量最高,在叶、茎、根中亦有低水平表达.
作 者：陶芳 朱苏文 范军 程备久 TAO Fang ZHU Su-Wen FAN Jun CHENG Bei-Jiu 作者单位：安徽农业大学生命科学院生物物理实验室,合肥,230036 刊 名：植物生理与分子生物学学报 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF PLANT PHYSIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY 年，卷(期)： 32(6) 分类号：Q94 关键词：玉米 FAD2基因 半定量RT-PCR maize FAD2 gene semi-quantitative RT-PCR中国水仙MADS-box基因克隆及其序列分析
采用同源克隆方法首次克隆了一条中国水仙MADS-box基因,命名为NtMADS.该基因长599bp,编码199AA,具有植物MADS-box基因特有的典型结构MADS-box和K-box.
作 者：鞠玉栋 郑回勇 吴维坚 陈永快 何炎森 吴松海 作者单位：福建省农业科学院甘蔗研究所,福建漳州,363005 刊 名：安徽农学通报 英文刊名：AUHUI AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN 年，卷(期)： 14(21) 分类号：Q331.8 关键词：中国水仙 花发育 基因克隆 序列分析水牛SRY基因的克隆及序列分析
根据荷斯坦牛SRY基因设计一对引物,采用聚合酶链式反应(PCR)技术,以中国沼泽型水牛(Swamp Buffalo)基因组DNA为模板,扩增得到SRY(Sex deterimation region of Y chromosome)全序列约bp,其中1～504bp为5'启动子区,1196～2005bp为3'侧翼序列,在505～1195bp为SRY的外显子,编码229个氨基酸.在SRY HMG-box区域设计探针,用地高辛标记后分别与雄性、雌性水牛基因组DNA进行Southern杂交,结果显示该段序列只在雄性DNA样本中有杂交信号,证明SRY基因为雄性特异.BLAST比对结果显示与牛属动物SRY基因的'同源性为96%,其中SRY基因HMG box区域同源性高达99%,说明SRY基因具有高度的进化保守性.
作 者： 作者单位： 刊 名：中国生物工程杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINA BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 26(7) 分类号：Q785 关键词：水牛 SRY基因 Southern杂交人hole基因的克隆和序列分析
目的 克隆人的hole基因,并进行生物信息学分析.方法 以胚胎心脏cDNA文库为模板,进行PCR扩增得到hole基因的.ORF.并进行亚克隆入PMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,用Xho1进行酶切和测序鉴定阳性克隆.利用Internet和GeneBank数据库对测序结果正确的hole基因进行生物信息学分析. 结果克隆了hole基因,测序结果正确;生物信息学分析表明, hole基因开放读码为960 bp,编码319个氨基酸;同源性分析表明,人的hole与鼠、鸡hole蛋白具有高度同源性.多种组织的半定量RT-PCR研究表明,该基因在心脏、肝脏、肺、脑、肾脏、脾脏、胰脏均有表达,其心脏表达最高. 结论成功克隆hole基因,对其功能进行了初步预测,为进一步的功能研究打下基础.
作 者：姚峰 周军媚 王佐 陈春芳 吴端生 刘鑫 余坚 作者单位：姚峰(南华大学,实验动物学部,湖南,衡阳,421001;南华大学,心血管病研究所)周军媚(南华大学,生命科学与技术学院)
王佐(南华大学,心血管病研究所)
陈春芳,吴端生,刘鑫,余坚(南华大学,实验动物学部,湖南,衡阳,421001)
刊 名：南华大学学报（医学版） 英文刊名：JOURNAL OF UNIVERSITY OF SOUTH CHINA(MEDICAL EDITION) 年，卷(期)：2009 37(3) 分类号：Q785 关键词：hole基因 PCR 克隆 序列分析★ Toxoplasma gondii Mei2序列的电子延伸与分析
★ 教学应用与研究在时间序列分析课程教学中的有机结合的研究论文
★ sTNFR Ⅱ和VIP融合蛋白的基因克隆表达、纯化及活性检测
