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锯缘青蟹NAGase在DMSO溶液中的失活动力学
以二甲亚砜(DMSO)为效应物,研究其对锯缘青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.结果表明,酶的剩余活力随着DMSO浓度增高而迅速下降,当DMSO浓度达4.0 mol/dm3时,酶活力几乎完全丧失.该酶在低于2 mol/dm3的DMSO溶液中的失活作用表现为可逆过程.导致酶活力丧失50%的DMSO浓度(IC50)为0.75 mol/dm3.应用酶失活过程的.底物反应动力学方法测定了游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)在不同浓度DMSO溶液中的微观失活速度常数k+0和k′+0,k+0明显大于k′+0,说明游离酶较酶-底物络合物对DMSO更为敏感,底物对酶被DMSO失活有保护作用.随着DMSO浓度增加,逆向微观复活速度常数k-0不断下降,这说明NAGase在高浓度DMSO中失活的可逆性减弱.
作 者:张继平陈清西 ZHANG Ji-ping CHEN Qing-xi 作者单位:张继平,ZHANG Ji-ping(细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室、厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;佛山科学技术学院生命科学学院,广东,佛山,528231)陈清西,CHEN Qing-xi(细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室、厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005)
刊 名:台湾海峡 ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF OCEANOGRAPHY IN TAIWAN STRAIT 年,卷(期): 25(1) 分类号:Q556.1 关键词:海洋生物 N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶 实验研究 锯缘青蟹 二甲亚砜 失活动力学锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶在甲醛溶液中的失活动力学研究
研究甲醛对锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase EC 3.2.1.52)活力的影响,结果表明:随着甲醛浓度的增大,酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的甲醛浓度(失活半衰期,IC50)为0.60 mol/L.酶在低浓度甲醛溶液中的失活过程显示为可逆失活.用底物反应动力学方法考察酶在甲醛溶液中的失活动力学,测定游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)在甲醛溶液中失活的微观速度常数,并比较游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)的正向反应的微观失活速度常数k+0>k'+0,表明底物对酶被甲醛的.失活作用有一定的保护作用.正向的失活速度常数k-0和k'-0随着甲醛浓度的增大而增大,而逆向的速度常数k-0随着甲醛浓度的增大而减小,表明随着甲醛浓度的增大,酶变性越来越快,而活力恢复越来越难.
作 者:谢进金 张继平王勤 杨学敏 林建成 陈清西 XIE Jin-jin ZHANG Ji-ping WANG Qin YANG Xue-min LIN Jian-cheng CHEN Qing-xi 作者单位:厦门大学生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005 刊 名:厦门大学学报(自然科学版) ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE) 年,卷(期):2006 45(1) 分类号:Q356.1 关键词:锯缘青蟹 N-乙酰氨基葡萄糖苷酶 甲醛 失活动力学金属离子对锯缘青蟹NAGase活力的影响
本文研究了几种金属离子对锯缘青蟹(Scylla serrata)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.其结果表明:Li+、Na+和K+对酶活力没有明显影响,Mg2+、Ca2+和Ba2+对该酶均有激活作用,激活程度依次为Ca2+>Ba2+>Mg2+.Al3+、Fe3+、Cd2+、Pb2+和Hg2+对该酶具有一定的抑制作用,2.0μmol/dm3的Hg2+可以使酶活力完全丧失.Co2+对酶的效应是先激活后抑制,Mn2+对酶仅有轻微的'激活作用.Cd2+和Fe3+对锯缘青蟹NAGase的抑制作用都呈竞争性-反竞争性混合Ⅱ型效应,Cd2+的抑制常数KI和KIS分别为23.9、5.0 mmol/dm3,Fe3+的抑制常数KI和KIS分别为395.5、135.6μmol/dm3.KI>KIS,说明酶-底物络合物(ES)与抑制剂的亲和力比游离酶(E)与抑制剂的亲和力大.
作 者:杨学敏 谢进金 张继平林建成 陈清西 YANG Xue-min XIE Jin-jin ZHANG Ji-ping LIN Jian-cheng CHEN Qing-xi 作者单位:杨学敏,YANG Xue-min(厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室、厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;漳州职业技术学院食品与生物工程系,福建,漳州,363000)谢进金,XIE Jin-jin(厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室、厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;泉州师范学院生物系,福建,泉州,36)
张继平,ZHANG Ji-ping(厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室、厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005;广东佛山科学技术学院生命科学学院,广东,佛山,528231)
林建成,陈清西,LIN Jian-cheng,CHEN Qing-xi(厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室、厦门大学生命科学学院,福建,厦门,361005)
刊 名:台湾海峡 ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF OCEANOGRAPHY IN TAIWAN STRAIT 年,卷(期): 25(3) 分类号:Q556.1 关键词:海洋生物 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 锯缘青蟹 酶活力 金属离子 抑制机理锯缘青蟹血细胞的形态及分类
对锯缘青蟹(Scylla serrata)血细胞染色的抗凝剂、染色方法进行筛选.蟹样品体质量约250 g.采用亚甲基蓝、瑞氏法染色后,在Olympus油镜下观察、记数、测量,再结合电镜超薄切片观察结果对锯缘青蟹血细胞进行分类.根据血细胞质中颗粒的有无、大小、折光性、染色特性及细胞的大小、核质比等,将锯缘青蟹血细胞分为4种:(1)无颗粒细胞,细胞质中无颗粒;(2)小颗粒细胞,细胞质中有深蓝色小颗粒;(3)中间型细胞,细胞质中既有深蓝色小颗粒,又有折光性红色大颗粒;(4)大颗粒细胞,细胞质中充满了具有折光性的红色大颗粒.4种血细胞的大小顺序从小到大依次为无颗粒细胞、小颗粒细胞、中间型颗粒细胞、大颗粒细胞;核质比则相反,分别为54.01%、37.13%、25.37%、17.49%;其数量百分比分别占20.92%、40.30%、19.39%、19.39%.根据伪足的`多少,对4种血细胞在机体的免疫防御机制中所起的不同作用进行了简单探讨.
作 者:周凯 房文红 乔振国 ZHOU Kai FANG Wen-hong QIAO Zhen-guo 作者单位:中国水产科学研究院,东海水产研究所,农业部海洋与河口渔业重点开放实验室,上海,200090 刊 名:中国水产科学 ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF FISHERY SCIENCES OF CHINA 年,卷(期):2006 13(2) 分类号:Q959.223 关键词:锯缘青蟹 血细胞 形态结构 分类锯缘青蟹视神经节FSH和LH的免疫识别
甲壳动物的视神经节含有性腺抑制激素(Gonad inhibiting hormone, GIH),长期以来视神经节被理解为生殖抑制效应.本研究应用脊椎动物卵泡刺激素(Fllicle stimulating hormone,FSH)抗体和黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)抗体,从锯缘青蟹(Scylla serrata)视神经节的.视外髓、视内髓和视端髓检测到FSH和LH免疫细胞化学阳性反应.锯缘青蟹视神经节中的FSH和LH免疫阳性物质,可能参与了生殖神经内分泌调节.
作 者:叶海辉 黄辉洋 李少菁 王桂忠 YE Hai-hui HUANG Hui-yang LI Shao-jing WANG Gui-zhong 作者单位:厦门大学海洋学系,福建,厦门,361005 刊 名:厦门大学学报(自然科学版) ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE) 年,卷(期):2006 45(3) 分类号:Q421 关键词:锯缘青蟹 视神经节 FSH LH 免疫细胞化学