以下是小编帮大家整理的大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养条件的优化研究（共含5篇），仅供参考，大家一起来看看吧。同时，但愿您也能像本文投稿人“huikangsc”一样，积极向本站投稿分享好文章。
大鼠骨髓间充质干细胞分离与培养条件的优化研究
目的:建立和优化大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的.分离培养条件,以获得群体均一、未分化状态保持良好的MSCs.方法:收集不同周龄大鼠骨髓细胞;以不同浓度Percoll密度梯度离心分离骨髓单个核细胞;以60%低糖DMEM40%MCDB201为基础培养基,培养24h去悬浮细胞;以不同接种密度传代培养;碱性磷酸酶染色和油红O染色考察MSCs向骨和脂肪组织分化的潜能.结果:采用57%Percoll液的分离效果优于70%Percoll液.6周龄(体重约180g)大鼠能在细胞分离的质和量上达到最佳效果.24h进行悬浮细胞去除、5×103/cm2接种密度传代培养,光镜和电镜显示MSCs增殖能力强,功能状态活跃,成脂成骨实验显示多向分化潜能保持良好.结论:优化大鼠周龄、分离液的密度、细胞培养条件及改进培养方法有助于获得多向分化潜能保持良好的均一的MSCs.
作 者：晏丹 舒赛男 YAN Dan SHU Sai-nan 作者单位：晏丹,YAN Dan(武汉科技大学医学院病理教研室,湖北,武汉,430065)舒赛男,SHU Sai-nan(华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科,湖北,武汉,430030)
刊 名：现代生物医学进展 ISTIC英文刊名：PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年，卷(期)： 8(1) 分类号：Q813.1 关键词：间充质干细胞 分离 培养 优化大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养
为了确定大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离和培养的方法,建立了稳定的MSCs体外培养扩增体系,通过密度梯度离心和贴壁筛选法分离培养大鼠MSCs,观察了细胞的形态,研究了其增殖及生长特征,并应用流式细胞术测定了细胞周期及CD29,CD44,CD45和HLA-DR的.表达.结果表明,在体外培养条件下大鼠MSCs贴壁生长,为成纤维细胞样;CD45和HLA-DR的表达呈阴性,CD29和CD44的表达呈阳性;细胞周期的G0/G1期约占95%,具有原始细胞的特征.说明建立的体外培养扩增体系可获得形态单一、生长稳定、增殖性较强、较均一的大鼠MSCs.
作 者：李延清 刘霞 LI Yan-qing LIU Xia 作者单位：李延清,LI Yan-qing(延安大学,生命科学学院,陕西,延安,716000)刘霞,LIU Xia(延安大学,生命科学学院,陕西,延安,716000;西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100)
刊 名：西北农林科技大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 34(5) 分类号：Q813.1+1 关键词：大鼠 骨髓间充质干细胞 细胞形态 细胞周期 密度梯度离心 流式细胞术大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养表型鉴定与标记
目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分离培养、表型鉴定和标记的方法,为临床进行细胞移植治疗心、肝、脑等器官急性衰竭提供种子细胞.方法无菌条件下取大鼠股骨、胫骨和腓骨,用冲洗法冲出骨髓,用直接贴壁法分离纯化MSCs,体外扩增,用免疫细胞化学法及流式细胞仪分别对培养的MSCs进行鉴定,并检测第3代MSCs的.细胞周期.结果体外培养的原代MSCs 72 h内可见有少量贴壁细胞,7 d左右达到汇合.免疫细胞化学示,MSCs CD29、CD44、CD73、CD105、CD166表达阳性,而CD14、CD34、CD45表达阴性.流式细胞仪示,CD14阳性率为0.19%、CD29为64.36%、CD34为0.17%、CD44为86.73%、CD45为0.18%、CD73为90.21%、CD105为74.25%、CD166为54.60%.细胞周期显示,第3代MSCs约有90%的细胞处于G0/G1期.结论MSCs在体外很容易分离培养和扩增,DAPI标记MSCs敏感性好,标记效率高,可作为标记细胞的一种有效手段,MSCs体外培养成功为细胞移植治疗急危重症器官衰竭提供新的治疗途径.
作 者：何忠杰 马俊勋 方驰华 杨丽萍 作者单位：何忠杰,马俊勋(南方医科大学附属珠江医院普通外科,广东,广州,510280)方驰华(中国人民解放军总医院304急救部,北京,100037)
杨丽萍(中国人民解放军总医院304烧伤研究所,北京,100037)
刊 名：中国急救医学 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CRITICAL CARE MEDICINE 年，卷(期)： 25(12) 分类号：Q503 Q813.1+1 关键词：骨髓间充质干细胞 分离培养 表型 细胞周期 大鼠 流式细胞仪成体狗骨髓间充质干细胞的分离和体外培养的初步研究
目的 探索成体狗骨髓间充质干细胞(MSCs)的分离、体外培养,为其将来应用提供实验依据.方法 无菌条件下抽取狗肋骨骨髓,Ficoll分离液(密度1.077g/ml)梯度离心分离单个核细胞,在含10%新生牛血清的DMEM中,37℃、5%CO2、饱和湿度下常规培养,取贴壁细胞并进行传代,观察细胞的生长形态.结果 取得较高纯度的成体狗骨髓MSCs,并保持细胞的活性;成体狗骨髓MSCs在体外培养中,为贴壁生长的单个核球形细胞,培养3～4d后开始大量增殖,为纺锤形和星形多突起的细胞贴壁生长,6～8d细胞达到70%～90%融合.传代细胞3～4d即可再次传代.结论 采用Ficoll分离液进行梯度离心分离,可获较高纯度的MSCs,是实用、便捷和可行的.方法 ;而且在体外培养的条件下能大量增殖,形成形态均一的细胞集落,可以成为进一步进行细胞扩增或其它实际应用的基础.
作 者：雷开键 杜一平姜雄 熊永祥 贾钰铭 宋玉光 林萍 罗华 作者单位：宜宾市第二人民医院肿瘤科,四川,宜宾,644000 刊 名：四川医学 ISTIC英文刊名：SICHUAN MEDICAL JOURNAL 年，卷(期)： 28(10) 分类号：Q813.1 关键词：间充质干细胞 细胞培养 体外 骨髓 狗优化分离及培养骨髓间充质类成纤维样集落细胞的实验研究
[目的]探讨分离培养骨髓间充质类成纤维样集落细胞的最佳条件,并观察其生物学活性.[方法]采用优化分离方法,常规细胞培养、传代技术,光镜技术及细胞增殖活性检测法,观察不同浓度血清、不同接种密度对骨髓间充质类成纤维样集落细胞生长、增殖、形态及集落形成率的`影响,观察培养细胞的生物学特性并将该类细胞向成骨细胞诱导分化.[结果]以差速贴壁法,加入10%进口胎牛血清、接种密度为5×104个/ml的培养条件为最适宜细胞生长;在此条件下,具有快速增殖的能力及较高的集落形成率;光镜下细胞呈梭状或类成纤维状,2～8代的细胞呈均质状;诱导后的成骨细胞AKP检测成阳性.[结论]明确了骨髓间充质类成纤维样集落细胞培养所需的细胞接种密度,血清培养浓度,该类细胞具有干细胞特性,为进一步深入研究该类细胞的应用打下了基础.
作 者：张璇 林春博 杨渊 谢富荣 作者单位：张璇,杨渊,谢富荣(广西骨伤医院,广西,南宁,530012)林春博(广西中医学院,广西,南宁,530001)
刊 名：广西中医学院学报 英文刊名：JOURNAL OF GUANGXI TRADITIONAL CHINESE MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)：2009 12(4) 分类号：Q25 关键词：优化分离 优化培养 骨髓间充质类成纤维样集落细胞