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安徽省猪圆环病毒2型感染的流行病学调查
目的 了解安徽地区猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)的感染状况.方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采自安徽省14个地(市)的468份血清样品进行PCV2抗体检测,并运用PCR技术同步进行PCV2核酸检测.结果 PCV2抗体检测的平均阳性率为74.36%,且阳性率随猪的日龄增长而升高,皖南地区的阳性检出率明显高于淮北和江淮两个地区,PCR与ELISA检测结果的`符合率为99.37%.结论 安徽省猪群中普遍存在PCV2的感染,病毒血症与抗体共存现象显著.
作 者：李超 魏建忠 R英济 谢倩 孙裴 李郁 作者单位：李超,魏建忠,孙裴,李郁(安徽农业大学动物科技学院,合肥,230036)R英济(安徽巢湖畜牧兽医局,巢湖,238000)
谢倩(安徽省产品质量监督检验研究院,合肥,230051)
刊 名：中国微生态学杂志 ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF MICROECOLOGY 年，卷(期)： 22(4) 分类号：S852.65 关键词：猪圆环病毒2型 流行病学 ELISA PCR规模猪场圆环病毒2型感染的血清学调查
利用猪圆环病毒2型抗体酶联免疫检测试剂盒,对宁波市8个县(市)区的19个规模猪场的'524份血清样品进行分析,发现有16个猪场发生了PCV-2感染,猪场感染率为84.21%,全市猪的PCV-2平均感染率为49.81%(261/524),其中种猪的感染率为48.72%(123/269),断奶猪的感染率为54.18%(138/255).
作 者：鲍伟华 卢黎明 孙泽祥 裘贤平顾祥国 孙鹏烈 作者单位：鲍伟华(浙江大学动物科学学院,杭州,310027;浙江省宁波市畜牧兽医局,宁波,315012)卢黎明,孙泽祥(浙江省宁波市畜牧兽医局,宁波,315012)
裘贤平(浙江省奉化市畜牧中心,奉化,315500)
顾祥国(浙江省宁波市江北区畜牧兽医局,宁波,315012)
孙鹏烈(浙江省宁波市鄞州区畜牧中心,宁波,315012)
刊 名：中国畜牧兽医 ISTIC PKU英文刊名：CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)： 33(6) 分类号：S858.28 关键词：猪场 圆环病毒2型 感染 血清学猪圆环病毒2型核酸疫苗的构建及其免疫效果
[目的']构建猪圆环病毒2型(PCV2)ORF2基因疫苗,并对其免疫效果和安全性进行研究.[方法] 将PCV2 ORF2基因从pMD-ORF2*质粒(包含PCV2 SCH A株ORF2基因)酶切回收,插入到真核表达载体pcDNA-3.1(+)中,构建真核表达质粒pcDNA-ORF2,对该质粒进行酶切和PCR鉴定.将pcDNA-ORF2转染IBRS-2细胞,进行Western blotting检测.将构建好的pcDNA-ORF2制成核酸疫苗,按100 μg/只腿部肌肉注射免疫Balb/c小白鼠,同时设pcDNA-3.1(+),PCV2全毒和PBS为对照,共免疫2次,间隔2周.分别于首免后第14天和56天采血,用ELISA法检测抗体;于首免后第56天,采用淋巴细胞增殖试验(MTT法)和流式细胞仪(FACS)对小鼠的细胞免疫进行检测.取首免后56 d小鼠的心肝、脾、肺、肾和脑等实质器官,采用PCR方法检测pcDNA-ORF2核酸疫苗的安全性.[结果] Western blotting结果显示,pcDNA-ORF2构建成功,并在哺乳动物细胞中获得表达.pcDNA-ORF2核酸疫苗能诱导小鼠产生较强的细胞免疫和体液免疫应答.PCV2 ORF2基因未整合到小鼠染色体上.[结论] pcDNA-ORF2可诱导小鼠产生免疫反应,其对小鼠是安全的.
作 者：王新 郭万柱 周婷 徐志文 王印 王小玉 作者单位：王新(西北农林科技大学,食品学院,陕西,杨陵,712100)郭万柱,徐志文,王印,王小玉(四川农业大学,动物生物技术中心,四川,雅安,625014)
周婷(西北农林科技大学,动物医学院,陕西,杨陵,712100)
刊 名：西北农林科技大学学报(自然科学版) ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF NORTHWEST A&F UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)： 36(8) 分类号：S852.65 关键词：猪圆环病毒2型 ORF2基因 核酸疫苗猪Ⅱ型圆环病毒四川分离株鉴定及其ORF 2基因序列分析
猪圆环病毒(Porcinecircovirus,PCV),属于圆环病毒科(Circoviridae),圆环病毒属(Circovirus),血清型为PCV-1和PCV-2[1].PCV-1首先由Tis2che-[2]于1974年从PK-15猪肾传代细胞系中分离获得,PCV-2首先由Clark[3]报道了是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原,随即相继报道了PCV-2与PDNSS(猪皮炎与肾炎综合症)、NP(增生性坏死性肿炎),PRDC(猪呼吸道综合征)、繁殖障碍、先天性颤抖、肠炎等疾病亦有重要关联[4-5],它常与猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)或猪细小病毒(PPV)并发感染或继发细菌感染[6].
作 者：王新 郭万柱 朱玲 徐志文 颜其贵 王印 王小玉 罗燕 周婷 作者单位：四川农业大学动物生物技术中心,四川,雅安,625014 刊 名：畜牧市场 英文刊名：STOCK BREEDING MARKET 年，卷(期)： “”(11) 分类号：S8 关键词：猪圆环病毒2型遗传标记毒株的构建及生物学特性鉴定
以临床分离的猪圆环病毒2型(PCV2)为材料,利用PCR法扩增病毒基因组,将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆.通过引物设计替换碱基,在病毒基因组内插入Sal Ⅰ限制性内切酶位点作为遗传标记,经重组质粒转染细胞获得带有遗传标记的新毒株.采用免疫过氧化物酶单层细胞试验、免疫电镜、核酸序列分析表明,在病毒感染细胞中检出病毒特异抗原,其抗原性、病毒形态学及基因序列与亲本毒株一致.鉴于新病毒基因组内插入一个SalⅠ酶切位点,用PCR与限制性片段长度多态性分析法可与野生型病毒相鉴别.新毒株经细胞连续传60代,体外培养增殖性能稳定,毒价可达106.6TCID50/mL.取病毒培养物经静脉和滴鼻途径接种35日龄抗体阴性仔猪4头,接种后表现出体温升高、进行性消瘦、被毛粗糙及体表淋巴结肿胀症状,迫杀后多种脏器中均能检测到病毒抗原与核酸.研究表明,利用感染性分子克隆手段构建带有遗传标记的PCV2新毒株,为进一步开展该病毒的'致病性、疫苗免疫、分子诊断等研究奠定了基础.
作 者：刘长明 危艳武 张超范 谭斌 陆月华 孔宪刚 LIU Chang-ming WEI Yan-wu ZHANG Chao-fan TAN Bin LU Yue-hua KONG Xian-gang 作者单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 刊 名：中国预防兽医学报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)： 28(6) 分类号：S852.65+9.2 关键词：猪圆环病毒2型 遗传标记病毒 生物学特性猪圆环病毒2型Rep蛋白在真核细胞中的表达与定位
为了构建Rep蛋白真核表达质粒,研究PCV2复制过程中的亚细胞分布.本研究借助PCR方法扩增PCV2的Rep基因,并将其亚克隆到真核表达载体pEGFP-C3中.并转染PK15细胞和Vero细胞.结果显示,重组的pEGFP-PCV2-Rep融合蛋白能够在PK15细胞和Vero细胞中表达.结论认为pEGFP-PCV2-Rep质粒转染PK15细胞和Vero细胞后48h,PCV2的.Rep蛋白主要定位在PK15细胞和Vero细胞的细胞核.
作 者：张鑫 尹伟 金玉兰 何嘉玲 颜焰 周继勇 ZHANG Xin YIN Wei JIN Yu-lan HE Jia-ling YAN Yan ZHOU Ji-yong 作者单位：浙江大学农业部动物疫病病原学与免疫控制重点开放实验室,杭州,310029;浙江大学传染病诊治国家重点实验室,杭州,310003;浙江大学濒危野生动物保护遗传与繁殖教育部重点实验室,杭州,310058 刊 名：中国动物传染病学报 英文刊名：CHINESE JOURNAL OF VETERINARY PARASITOLOGY 年，卷(期)：2009 17(1) 分类号：S858.282.659.2 关键词：猪圆环病毒2 Rep蛋白 细胞定位