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花粉介导法获得玉米转基因植株
利用花粉作为外源基因的`载体进行遗传转化在玉米(ZeamaysL.)上获得了成功。以玉米自交系太9101、综31等为受体，以pGLⅡ_RC_1质粒为供体，在玉米开花期，用花粉与质粒DNA混合并附加超声波处理，然后辅以人工授粉的方法将外源基因导入到受体中。DNA斑点杂交和PCR扩增以及PCR_Southernblot杂交检测结果证明，几丁质酶基因确已导入玉米自交系中。所得结果表明：玉米花粉可以介导外源基因的转化。利用花粉作为载体介导外源基因转化，避免了传统的基因枪法和土壤杆菌法转化所要求的组织培养技术，转化方法简单，易操作，具有很强的实用性。
作 者：王景雪 孙毅 崔贵梅 胡晶晶 作者单位：山西省农业生物技术研究中心， 太原 030031 刊 名：植物学报 ISTIC SCI英文刊名：ACTA BOTANICA SINICA 年，卷(期)： 43(3) 分类号：Q943.2 关键词：玉米 花粉介导法 基因转化玉米基因转化的离体子房注射及其转基因植株的鉴定
用微量注射法对玉米(Zea mays L.)进行基因转化已获得成功, 但这种方法是在田间进行的.,污染较大, 操作时劳动强度大,转化率低,而且受气温影响,气温下降则种子不能成熟.采用离体注射培养法,取下授粉24 h后的玉米雌穗,剥去苞叶,在超净工作台进行微量注射,然后切成小块放在培养瓶中,在光照培养箱内培养,3～4周可直接获得种子.这种方法克服了非离体培养的缺点,提高了转化效率.种子萌发后进行植株抗性筛选和分子检测, 得到了具抗性的、PCR 和Southern杂交结果均为阳性的转基因植株.
作 者：沈世华 张秀君 郭奕明 荆玉祥 作者单位：中国科学院植物研究所, 刊 名：植物学报 ISTIC SCI英文刊名：ACTA BOTANICA SINICA 年，卷(期)：2001 43(10) 分类号：Q943.2 关键词：玉米 基因转化 离体子房注射 基因鉴定高赖氨酸蛋白基因导入水稻及可育转基因植株的获得
构建了一个植物高效表达质粒，使来源于四棱豆(Psophocarpus tetragonolobus （L.）DC)的高赖氨酸蛋白基因(lys)受控于单子叶植物ubiqutin强启动子下表达。用基因枪法将其导入水稻（Oryza sativa L.）幼胚诱导的愈伤组织，经潮霉素抗性筛选，得到可育的再生植株。经PCR和Southern blotting检测，表明该基因已整合到水稻的基因组中。GUS组织化学染色表明转基因水稻植株的叶、茎和根中均有gus基因的.表达。测定11株转基因水稻叶片中赖氨酸含量，大部分植株有不同程度的提高，最高幅度为16.04%。
作 者：高越峰 荆玉祥 沈世华 田世平匡廷云 Samuel S.M.SUN 作者单位：高越峰,荆玉祥,沈世华,田世平,匡廷云(中国科学院植物研究所，北京 100093)Samuel S.M.SUN(香港中文大学)
刊 名：植物学报 ISTIC SCI英文刊名：ACTA BOTANICA SINICA 年，卷(期)： 43(5) 分类号：Q943.2 关键词：高赖氨酸蛋白基因 基因枪 转基因水稻 赖氨酸含量转苏云金杆菌毒蛋白基因玉米植株的获得及其抗虫性分析
玉米( Zea mays L.)转化成功与否与基因型密切相关.在转化过程中,除少数模式品种能够形成再生频率较高且易转化的Ⅱ型愈伤组织外,大多数栽培品种往往只能够形成再生频率较低且不易转化的Ⅰ型愈伤组织.因此探索Ⅰ型愈伤组织的诱导及其转化条件,提高转化效率,对直接改良玉米优良自交系具有重要意义.应用基因枪转化技术将苏云金杆菌( Bacillus thuringiensis ) cry1Ac3基因导入玉米优良自交系E28及340的Ⅰ型胚性愈伤组织中,经过膦丝菌素(PPT)或潮霉素(HygB)筛选,获得了再生植株.经PCR检测、Southern blot分析及Bt毒蛋白ELISA检测证实,外源基因已整合到玉米基因组中,并已获得表达.抗虫性分析结果表明,部分转基因玉米植株对玉米螟虫有较强的'抗性.还比较了PPT和HygB两种筛选剂的筛选效果,表明PPT筛选的抗性愈伤组织的再生频率要高于HygB筛选的再生频率.
作 者：李慧芬 李旭刚 刘翔 常团结 肖桂芳 朱祯 LI Hui-fen LI Xu-gang LIU Xiang CHANG Tuan-Jie XIAO Gui-Fang ZHU Zhen 作者单位：中国科学院遗传研究所,北京,100101 刊 名：植物学报 ISTIC SCI英文刊名：ACTA BOTANICA SINICA 年，卷(期)：2002 44(6) 分类号：Q943.2 关键词：玉米 遗传转化 植株再生 抗虫基因 maize genetic transformation plant regeneration insecticidal gene