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Patatin启动子驱动的乙肝表面抗原基因在马铃薯中的表达
按常规分子克隆方法将马铃薯中高表达的patatin启动子和乙肝表面抗原基因分别插入双元质粒pBI101成为植物表达载体pPHG9,由前者驱动后者表达;通过农杆菌转化法将乙肝表面抗原基因导入马铃薯并获得再生植株;用ELISA方法检测经PCR鉴定的.转基因植株中乙肝表面抗原的含量,对照标准曲线得知转基因马铃薯植株中的乙肝表面抗原含量高达100～174 ng/mg可溶性蛋白.
作 者：宋东光 王光清 汪训明 Song Dongguang Wang Guangqing Wang Xunming 作者单位：复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,上海,33 刊 名：高技术通讯 ISTIC EI PKU英文刊名：HIGH TECHNOLOGY LETTERS 年，卷(期)： 10(2) 分类号：Q34 Q94 关键词：马铃薯 patatin启动子 乙肝表面抗原基因 基因表达AtSTP3启动子控制的外源基因在转基因水稻中的特异表达研究
利用PCR技术从哥伦比亚型拟南芥基因组DNA中分离了AtSTP3绿色组织特异表达的启动子,序列分析表明,扩增片段(1 774 bp)与已报道序列的'相应区域同源性达99.9%.将其与GUS报告基因融合在一起,构建了植物表达载体,并由农杆菌介导法导入水稻品种‘中花11’中.对转基因水稻植株中的GUS活性进行定性与定量测定结果表明,AtSTP3启动子可驱动GUS报告基因在转基因水稻植株叶片中特异性表达,而在根和种子等器官中不表达或表达活性极弱,AtSTP3启动子表现出明显的组织特异性.
作 者：卢碧霞 马守才 张改生 夏勉 辛莉 LU Bi-xia MA Shou-cai ZHANG Gai-sheng XIA Mian XIN Li 作者单位：卢碧霞,LU Bi-xia(西北农林科技大学,农学院,陕西,杨陵,712100;国家作物分子设计中心,北京,100085)马守才,张改生,MA Shou-cai,ZHANG Gai-sheng(西北农林科技大学,农学院,陕西,杨陵,712100)
夏勉,辛莉,XIA Mian,XIN Li(国家作物分子设计中心,北京,100085)
刊 名：西北植物学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA 年，卷(期)： 26(6) 分类号：Q786 S511 关键词：拟南芥AtSTP3启动子 转基因水稻 基因表达 GUS活性PttGA20ox1基因在转化烟草植株中的表达
构建了PttGA20ox1基因的植物表达载体并在烟草植株中进行了表达.结果表明:转化烟草与对照烟草之间以及转化烟草之间的形态特征出现很大差异;所有转PttGA20ox1基因烟草的.顶端优势得到明显促进,其生长速度明显高于对照烟草.实验结果为今后利用PttGA20ox1基因促进木本植物的顶端优势奠定了基础.
作 者：李伟 陈晓阳 杜金友 高琼 LI Wei CHEN Xiao-yang DU Jin-you GAO Qiong 作者单位：北京林业大学林木、花卉遗传育种教育部重点实验室,北京,100083 刊 名：西北植物学报 ISTIC PKU英文刊名：ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA 年，卷(期)：2006 26(1) 分类号：Q786 关键词：PttGA20ox1基因 植物表达载体 顶端优势人表皮生长因子(hEGF)基因在蓝藻中的表达
人表皮生长因子(hEGF)是由53个氨基酸组成的蛋白,在临床上内服与外敷可促进内外表皮细胞的.生长.将人工合成的hEGF基因连接到质粒pRL-489上,位于启动子psbA下游.验证连接成功后,用三亲接合转移方法将载体pRL-hEGF导入聚球藻Synechococcus sp. PCC 7002和鱼腥藻Anabaena sp. PCC 7120.由于pRL-hEGF没有能在单细胞蓝藻中自主复制的复制子,通过筛选,hEGF在聚球藻7002中是整合到蓝藻染色体上进行表达的.用PCR扩增的方法在两种转基因藻中均检测到hEGF基因的存在.放射免疫分析证明,hEGF基因在两种转基因藻中均得到了表达.而且,在聚球藻7002中是采用分泌形式将表达产物分泌到培养液中.
作 者：戴 施定基 张卉 钟晖 冉亮 彭国宏 甘人宝 陈素娟 连慕兰 作者单位：戴,施定基,张卉,冉亮(中国科学院植物研究所,)钟晖,陈素娟(解放军301医院东亚免疫研究所,)
彭国宏(中国科学院海洋研究所,)
甘人宝(中国科学院生物化学研究所,)
连慕兰(北京师范大学生命科学学院,)
刊 名：植物学报 ISTIC SCI英文刊名：ACTA BOTANICA SINICA 年，卷(期)： 43(12) 分类号：Q943.2 关键词：人表皮生长因子 鱼腥藻Anabaena sp. PCC 7120 聚球藻Synechococcus sp. PCC 7002 载体 转基因蓝藻 三亲接合转移pfl-act基因在大肠杆菌中的高效表达及其纯化
丙酮酸甲酸裂解酶是肠道细菌在厌氧代谢中十分关键的酶,丙酮酸甲酸裂解酶激活因子(pyruvate formate lyase activator,PFL-A)在功能上具有重要的作用.为进一步研究PFL-A的`激活机理,以大肠杆菌K-12的基因组为模板,通过GenBank上公布的序列设计引物,扩增出目的基因,克隆到pMD18-T载体,经测序,所扩增出的基因与pfl-act基因具有99%的同源性.将pfl-act连接到高效表达载体pET-22b(+)中,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,结果发现,pfl-act以包涵体形式表达.改变诱导剂、诱导剂量或培养温度,对包涵体的形成均没有明显的影响.
作 者：杨登峰 韦宇拓 黄志明 周兴 黄日波 YANG Deng-feng WEI Yu-tuo HUANG Zhi-ming ZHOU Xing HUANG Ri-bo 作者单位：杨登峰,黄志明,周兴,YANG Deng-feng,HUANG Zhi-ming,ZHOU Xing(广西科学院,广西,南宁,530003)韦宇拓,黄日波,WEI Yu-tuo,HUANG Ri-bo(广西大学,生命科学与技术学院,广西,南宁,530005;广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西,南宁,530005)
刊 名：广西农业生物科学 ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE 年，卷(期)： 25(4) 分类号：Q782 关键词：丙酮酸甲酸裂解酶激活因子 包涵体 高效表达透明颤菌血红蛋白基因在苏云金杆菌中的表达
采用大肠杆菌与枯草杆菌的穿梭质粒pMK4作为载体,构建了含有果聚糖酶基因(sacB)启动子和vgb基因的重组质粒pMK-SV.通过原生质体和电转化,将pMK-SV转入苏云金杆菌中,经影印筛选得到转化子Bt4.对Bt4诱导表达,与原菌株相比Bt4的生长量增加了20.2%.
作 者：周艳芬 赵晓瑜 张玉 冯书亮 王容燕 ZHOU Yan-fen ZHAO Xiao-yu ZHANG Yu FENG Shu-liang WANG Rong-yan 作者单位：周艳芬,ZHOU Yan-fen(河北农业大学,生命科学学院,河北,保定,071001;河北大学,生命科学学院,河北,保定,071002)赵晓瑜,张玉,ZHAO Xiao-yu,ZHANG Yu(河北大学,生命科学学院,河北,保定,071002)
冯书亮,王容燕,FENG Shu-liang,WANG Rong-yan(河北省农林科学院,植物保护研究所,河北,保定,071000)
刊 名：河北大学学报（自然科学版） ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF HEBEI UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年，卷(期)：2006 26(1) 分类号：Q786 关键词：苏云金杆菌 vgb基因 表达 原生质 电转化人bcl-xL基因在转基因小鼠中的整合和表达
目的 研究人bcl-xL基因在显微注射所产生的子代小鼠中的整合、转录和表达情况.方法 采用PCR和Southern blot方法检测人bcl-xL基因在小鼠体内的整合;RT-PCR方法检测它们的bcl-xL mRNA水平;用Western blot及免疫组化法检测目的 蛋白的表达情况.结果 在显微注射所产生的转基因小鼠中,有4只为Southern blot检测阳性,并且在这4只小鼠及其子代中均检测到人bcl-xL的'mRNA和过表达的目的 蛋白.结论 由于在这些小鼠中既有外源基因的整合,又有其mRNA和蛋白质的表达,所以,它们是真正的转基因动物.
作 者：王芙蓉 姜永生 肖文伍 张苏明 袁慧 赵浩斌 郑新民 魏庆信 作者单位：王芙蓉,肖文伍,张苏明,袁慧(华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科,武汉,430030)姜永生(华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤科,武汉,430030)
赵浩斌,郑新民,魏庆信(湖北省农科院畜牧兽医研究所,武汉,430209)
刊 名：华中科技大学学报（医学版） ISTIC PKU英文刊名：ACTA MEDICINAE UNIVERSITATIS SCIENTIAE ET TECHNOLOGIAE HUAZHONG 年，卷(期)： 35(4) 分类号：Q3 关键词：人bcl-xL基因 转基因小鼠 基因整合 基因表达抗菌肽Dermaseptin S4及其突变体基因在大肠杆菌中的表达
目的 构建表达抗菌肽Dermaseptin S4(DS4)及其突变体K4-S4的工程菌,并表达目的 蛋白.方法 采用重叠延伸PCR法设计和扩增抗菌肽DS4及K4-S4基因,定向克隆入载体pUC-18中,经酶切、测序鉴定,重组至表达载体pGEX-4T-1中,构建抗菌肽DS4及K4-S4基因表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)plyS,经IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE鉴定.结果 构建的抗菌肽DS4及K4-S4基因工程菌所表达的目的 蛋白,经SDS-PAGE鉴定可见相对分子质量34 000的.特异性目的 条带,37℃诱导5 h的蛋白表达量最高,且多数以包涵体形式存在.结论 已成功构建抗菌肽DS4及K4-S4工程菌,并表达目的 蛋白,为进一步研究其功能和应用奠定了基础.
作 者：张庆华 韩跃武 谢俊秋 卢天龙 任惠子 冯惟萍 作者单位：兰州大学基础医学院生物化学与分子生物学研究所,兰州,730000 刊 名：中国生物制品学杂志 ISTIC英文刊名：CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS 年，卷(期)： 21(4) 分类号：Q78 关键词：抗菌肽 Dermaseptin S4 突变体 大肠杆菌 表达草鱼生长激素基因在毕赤酵母中的表达
将草鱼生长激素基因(cGH)的cDNA亚克隆到酵母表达载体pPIC9K中, 经电击转化导入毕赤巴斯德酵母GS115菌株,获得转化子.菌落PCR技术筛选证实cGH已经整合到了酵母染色体上.对重组酵母进行诱导表达, SDS-PAGE和Western印迹分析,结果表明cGH在毕赤巴斯德酵母GS115菌株中获得了高效表达.
作 者：孟亚鹏 徐敏 代焕梅 丁秀琼 张海英 殷雪 刘世贵 龙章富 MENG Ya-peng XU Min DAI Huan-mei DING Xiu-qiong ZHANG Hai-ying YIN Xue LIU Shi-gui LONG Zhang-fu 作者单位：孟亚鹏,徐敏,代焕梅,丁秀琼,张海英,殷雪,MENG Ya-peng,XU Min,DAI Huan-mei,DING Xiu-qiong,ZHANG Hai-ying,YIN Xue(四川大学生命科学学院,成都,610064)刘世贵,龙章富,LIU Shi-gui,LONG Zhang-fu(四川大学生命科学学院,成都,610064;成都川大创新生物技术研究所)
刊 名：四川动物 ISTIC PKU英文刊名：SICHUAN JOURNAL OF ZOOLOGY 年，卷(期)：2006 25(1) 分类号：Q959.4 TQ926 关键词：草鱼 生长激素基因 pPIC9K表达载体 毕赤酵母 高效表达