下面是小编给大家带来的青藏高原藏族外周血淋巴细胞cDNA文库的构建和鉴定（共含3篇），以供大家参考，我们一起来看看吧!同时，但愿您也能像本文投稿人“瞌睡虫的眠眠夏”一样，积极向本站投稿分享好文章。
青藏高原藏族外周血淋巴细胞cDNA文库的构建和鉴定
目的: 构建藏族外周血淋巴细胞全长cDNA文库并鉴定其质量.方法: 分离健康藏族人外周血液的淋巴细胞并提取总RNA, 利用SMART(switching mechanism at 5′ end of RNA transcript)技术, 构建全长cDNA文库并进行文库滴度和重组率的'测定.扩增文库并随机挑取噬菌斑进行PCR鉴定插入片段的大小.结果: 构建的cDNA文库的滴度为1.8×109pfu/L, 重组率>98%, 文库扩增后的滴度达8×1012pfu/L, 插入片段的长度在0.75～2.0 kb之间,平均长度为1.35 kb.结论: 构建的藏族外周血淋巴细胞cDNA文库具有很高的质量, 为进一步筛选、克隆藏族低氧反应相关基因奠定坚实的基础.
作 者：陈云天 吴建芳 曹越 格日力 CHEN Yun-tian WU Jian-fang CAO Yue GE Ri-li 作者单位：青海大学高原医学研究中心,青海,西宁,810001 刊 名：细胞与分子免疫学杂志 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)： 22(2) 分类号：Q785 关键词：藏族 淋巴细胞 cDNA文库野生一粒小麦BAC文库的构建和鉴定
以细菌人工染色体pECBAC1为载体,构建了野生一粒小麦(Triticum boeoticum B oiss)的基因组BAC文库.该文库共包含约17万个克隆,平均插入片段长度为104 kb,按野生一粒小麦基因组为5 600 Mb计算,文库覆盖了约3倍的该物种基因组.用大麦叶绿体psb A基因和玉米线粒体atp6基因作混合探针,检测发现该文库中含细胞器基因组同源序列的克隆数小于1% .该文库的'建成,为小麦基因的克隆及基因组学研究提供了技术平台.
作 者：陈凡国 张学勇 夏光敏 贾继增 作者单位：陈凡国(中国农业科学院品种资源研究所,农业部作物种质资源与生物技术重,点实验室,北京,100081山东大学生命学院,济南,250100)张学勇,贾继增(中国农业科学院品种资源研究所,农业部作物种质资源与生物技术重,点实验室,北京,100081)
夏光敏(山东大学生命学院,济南,250100)
刊 名：植物学报 ISTIC SCI英文刊名：ACTA BOTANICA SINICA 年，卷(期)： 44(4) 分类号：Q943 关键词：野生一粒小麦 BAC文库 基因组 Triticum boeoticum BAC library genome人心房肌KChIP2基因表达质粒pEGFP-KChIP2的构建和鉴定
目的:KChIP5作为瞬时外向钾通道(Ito)最重要的辅助亚基,在调控通道基因表达和电流特性中起重要作用.本实验拟构建人心房肌KChIP2基因表达质粒,为研究KChIP2对Ito的.调控功能奠定基础.方法:①提取人心房肌总RNA,逆转录得到cDNA;②通过特异性引物进行PCK扩增得到KChIP2编码区全长序列,亚克隆到pMD18-T载体中,得到重组克隆质粒pMD18-T-KChIP2;③再设计带有酶切位点HindⅢ和BamH Ⅰ的特异性引物,对重组克隆质粒pMD18-T-KChIP2进行PCK扩增,得到含有酶切位点的KChIP2编码区全长序列;④对含有酶切位点的KChIP2全长片段和pEGFP-c1进行HindⅢ和BamH Ⅰ双酶切反应,然后进行电泳后胶回收,再进行连接和转化反应;⑤提取质粒,测序鉴定.结果:质粒测序结果与PubMed数据库KChIP2(AY026328)序列比对,同源性为99%.结论:成功构建人心房肌KChIP2基因表达质粒,为下一步转染实验研究KChIP2对瞬时外向钾通道的功能调控奠定了基础.
作 者：谭晓秋 曾晓荣 白志茹 杨艳 刘智飞 陈桂兰 裴杰 作者单位：泸州医学院心肌电生理学研究室,四川泸州,646000 刊 名：泸州医学院学报 英文刊名：JOURNAL OF LUZHOU MEDICAL COLLEGE 年，卷(期)：2009 32(3) 分类号：Q424 关键词：瞬时外向钾通道 心肌细胞 钾通道相关蛋白2 基因克隆